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PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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芹菜PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015173 |
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年，這是(shì)指在適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本建議(yì)復(fù)核一次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製不(bù)準確(què)引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降，可能會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
芹菜PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的。聚合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保持很高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選擇特異性和保守性高的靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無放射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本如血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
