產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
|
土(tǔ)拉(lā)杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015264 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效期一般為1年，這是(shì)指在適當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣本；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為陽性，否則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
土拉杆菌PCR檢測試劑(jì)盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的溫度下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也就(jiù)能保持很(hěn)高的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選擇(zé)特異(yì)性和保守性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一定要用同位素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
