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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
|
質型多角體病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015328 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染會出現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
質型(xíng)多角體(tǐ)病(bìng)毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其(qí)特異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測模板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在細(xì)菌學中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地將反應液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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