產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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致(zhì)病(bìng)性大(dà)腸杆菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015329 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期一般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫度下。核酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次(cì)實驗中同時滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下降，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
致病性(xìng)大(dà)腸杆菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模板的正確結合是關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合及引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模(mó)板與(yǔ)引物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行，結(jié)合的特異性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段也就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保守性高的靶基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將反應(yīng)液加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般(bān)用電泳分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
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