產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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豬弓形(xíng)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015337 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑一(yī)般要貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核一次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶基因的(dí)特異性與保(bǎo)守性。
豬弓(gōng)形蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確度。再通過選擇特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性高的靶基(jī)因區，其(qí)特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退火-延伸反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分離病毒或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
