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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
豬藍耳病(bìng)病(bìng)毒(高(gāo)致(zhì)病性)PCR檢測(cè)試劑盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨號(hào) |
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豬藍耳(ěr)病病(bìng)毒(dú)(高致病性)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015338 |
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低溫,避光。
有效(xiào)期(qī):一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一般為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴增部分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期,Ct值應小(xiǎo)於等於35;
3. 以上(shàng)要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本(běn);對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一次,若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期(qī),則(zé)判定為陽性,否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn),試劑汙染,樣品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當或試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑檢測效(xiào)能(néng)下降,可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。

②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
豬藍(lán)耳病病毒(高致病(bìng)性)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性,使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進行,結合的(dí)特異(yì)性大大(dà)增加,被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇特異(yì)性和保守性高(gāo)的(dí)靶基因區,其特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞;在(zài)病毒的(dí)檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶,一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後,即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析(xī),不一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素,無(wú)放射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或細菌及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血液,體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液(yè),毛發(fā),細(xì)胞(bāo),活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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