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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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豬牛縧(tāo)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015350 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效期一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結(jié)果應為陽性，有明顯的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會出現假陽性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當(dāng)或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可(kě)能會導致出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
豬牛縧蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒其中引物與模板(bǎn)的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結合的(dí)特(tè)異(yì)性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能保持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
