產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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豬(zhū)內源(yuán)性(xìng)逆轉錄病毒前(qián)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015349 |
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判定為陽性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與保守性。
豬(zhū)內源性(xìng)逆(nì)轉錄病(bìng)毒前病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要用同位素，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本(běn)如血液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
