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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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豬(zhū)皰疹病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015351 |
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光保存,避免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光。
有(yǒu)效期:一(yī)年
貨(huò)期:現貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一般為(wéi)1年,這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一般要貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。

u 閾值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性,有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn);對於可疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次,若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性,否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰性:無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣品交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性結果(guǒ);
2. 試劑運輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配製不準確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下(xià)降,可(kě)能會(huì)導致出現假陰性(xìng)結果。

②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
豬皰疹病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物與模(mó)板的正確結合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反應中模板(bǎn)與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的溫度下進行,結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā),被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過選擇(zé)特異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區,其特(tè)異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增加的,能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位);在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶,一(yī)次性地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應(yīng),一般在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析,不一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn),易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度要求低
不需要分離病毒(dú)或細菌及培(péi)養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
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