產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨號(hào) |
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豬(zhū)圓環病毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015360 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要(yào)求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則(zé)該次實驗視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑檢測效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
豬圓環病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物與模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在較高的溫(wēn)度下進行，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基(jī)因(yīn)區，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般用電泳(yǒng)分析，不一(yī)定要用同位素，無放射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求低
不需要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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