產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
轉基(jī)因(yīn)植(zhí)物PRSV基因PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
|
轉基(jī)因(yīn)植物PRSV基(jī)因PCR檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015368 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī):一年
貨(huò)期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效期一般為1年,這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽性(xìng),有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú),否則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
2.可疑(yí):有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn);對於可(kě)疑樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一次,若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,則判定(dìng)為陽(yáng)性,否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn),試(shì)劑汙染,樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存不當或(huò)試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降,可能會導致出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。

②鹼基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
轉基(jī)因植物PRSV基因PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板的正確(què)結合是關鍵。引物與模板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性,使(shǐ)反應中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以在較高的(dí)溫(wēn)度下進行,結(jié)合的(dí)特異性大(dà)大增(zēng)加,被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守性高(gāo)的靶基(jī)因區,其特異性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo);在病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要用(yòng)同位素(sù),無放射性汙染(rǎn),易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標本如血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術(shù)概論。
