產品中(zhōng)心(xīn)
核酸檢測試劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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豬(zhū)多(duō)殺性巴(bā)氏杆(gān)菌(jūn)(SPA)核(hé)酸檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015401 |
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū):低溫,避(bì)光。
有效期(qī):一(yī)年
貨(huò)期:現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià),產物檢測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿(mǎn)足,否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視為無效。
2.可疑:有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本;對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次,若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期,則(zé)判定(dìng)為陽性,否則判定(dìng)為陰性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴增期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境汙染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū),保存(cún)不當或試劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng),可能(néng)會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果。

②鹼基(jī)配對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶基因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
豬多殺性巴(bā)氏(shì)杆(gān)菌(SPA)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng),結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加,被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能保持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區,其(qí)特(tè)異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的,能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶(bǎ)細胞;在(zài)病毒(dú)的檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位);在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶,一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電泳分(fēn)析,不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素,無放射性汙染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要求低
不(bù)需要分離病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養細胞,DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本如血液(yè),體腔液,洗嗽液(yè),毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
