產(chǎn)品中心
核酸檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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非洲(zhōu)豬瘟(ASFV)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015409 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的有效期一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測結果應為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染，試劑汙染，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出現假陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
非洲豬瘟(wēn)(ASFV)核(hé)酸檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特異性大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很高的正確度(dù)。再(zài)通過選擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以指數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要求低(dī)
不需要分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
