產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
核(hé)酸(suān)檢測試劑盒(hé)
| 產品名稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
|
禽肺(fèi)病毒(dú)(APV)核酸檢測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015383 |
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避(bì)免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有(yǒu)效期:一(yī)年
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年,這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增部分(fēn)的試劑一般要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下,產物(wù)檢測部(bù)分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。

u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性,有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú),否則該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑(yí)樣本(běn);對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì),若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī),則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性,否(fǒu)則判定為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣品交叉(chā)汙(wū)染會出現假陽性結果;
2. 試劑運輸,保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下降(jiàng),可能(néng)會(huì)導致出現假陰性結(jié)果。

②鹼基配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性;
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
禽(qín)肺(fèi)病(bìng)毒(APV)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進行(háng),結合的(dí)特異性大(dà)大增加,被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶基(jī)因區,其特異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式增加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞(bāo);在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好後(hòu),即在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng),一般(bān)在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī),不(bù)一定要(yào)用同位素(sù),無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗嗽(sòu)液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術概論。
