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核酸檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 規格(gé) | 貨號 |
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犬源(yuán)性(xìng)成分(Canine)核酸檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015584 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的(dí)有效期(qī)一般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴增部(bù)分的試劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指數擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣本建議復核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測效能下降，可能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
犬(quǎn)源性成分(Canine)核酸檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物與(yǔ)模板的(dí)正確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(復性)可以在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下進行，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高(gāo)的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將反應液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產物一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定(dìng)要用同位(wèi)素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
