產品(pǐn)中(zhōng)心
核(hé)酸檢測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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肉(ròu)毒(dú)杆(gān)菌F型（CB-F）核(hé)酸檢測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015533 |
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣本建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存不當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
肉毒(dú)杆(gān)菌(jūn)F型（CB-F）核(hé)酸檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(復性)可以在較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下進行，結合(hé)的特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持很高的(dí)正確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將反應(yīng)液加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放射性(xìng)汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求低
不需要分離病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
