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核(hé)酸檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
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偽(wěi)狂犬(quǎn)病毒野(yě)毒株(zhū)(PRV-gE)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015412 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結(jié)果應為陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則(zé)判定為陽性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑汙染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守性。
偽狂犬病(bìng)毒(dú)野毒(dú)株(PRV-gE)核酸檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應中模板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度下進行，結合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也就能(néng)保持很高的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基因(yīn)區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將反應液加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
