產品中心(xīn)
核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號 |
|
豬傳染(rǎn)性(xìng)胃腸(cháng)炎病毒(TGEV)核酸(suān)檢測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015417 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑一般要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一次，若復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
豬(zhū)傳染性胃腸(cháng)炎(yán)病毒(TGEV)核酸檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物與模(mó)板的正確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其特(tè)異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指數方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好後，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
