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核(hé)酸檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
豬(zhū)藍耳病病毒經典(diǎn)型(xíng)(PRRSV-C)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名稱 | 規格 | 貨號 |
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豬藍耳(ěr)病病毒經(jīng)典型(xíng)(PRRSV-C)核酸(suān)檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015428 |
儲存條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免反復凍融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī):一年
貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一(yī)般為1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。

u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾(yù)值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值(zhí)應小於等於35;
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú),否則該次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本;對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次,若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū),保存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下降(jiàng),可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。

②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
豬(zhū)藍耳(ěr)病(bìng)病(bìng)毒經典(diǎn)型(PRRSV-C)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的正確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是遵循(xún)鹼基(jī)配對原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較高的(dí)溫度下(xià)進行,結(jié)合的特異(yì)性大大增(zēng)加,被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區,其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí),能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細(xì)胞;在病毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位);在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應,一般在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析,不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素,無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床標本如血液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液(yè),毛(máo)發,細(xì)胞,活PCR技術概論。
