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核(hé)酸檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨號(hào) |
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口蹄(tí)疫(yì)病毒O型(FMDV-O)核酸檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015429 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期一般為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該次實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣本；對於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一次，若復核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與保守性。
口蹄(tí)疫(yì)病毒O型(FMDV-O)核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物(wù)與模板的正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合(hé)的特(tè)異性大大增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
