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核酸(suān)檢測試(shì)劑盒
| 產(chǎn)品名稱 | 規格 | 貨號 |
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馬(mǎ)傳染性貧(pín)血(xiě)(EIAV)核酸(suān)檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015462 |
儲(chǔ)存條件:-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún),避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫(wēn),避光。
有效期(qī):一年
貨(huò)期:現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年,這是(shì)指在適當的儲存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分的試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物檢測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。

u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑:有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議復核一(yī)次,若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性,否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染,試劑汙(wū)染,樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測效(xiào)能下(xià)降,可能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。

②鹼基(jī)配對原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保守性。
馬傳染性(xìng)貧血(xiě)(EIAV)核(hé)酸檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模板的結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性,使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性)可以在較高的溫(wēn)度下進(jìn)行,結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大大增加(jiā),被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區,其(qí)特(tè)異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的,能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo);在(zài)病毒的檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位);在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應,一(yī)般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析,不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素(sù),無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染,易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增模板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如血(xiě)液,體腔(qiāng)液(yè),洗嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概論。
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