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核酸檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
腸(cháng)道病(bìng)毒(dú)EV/柯(kē)薩(sà)奇(qí)病毒CA核酸檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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腸(cháng)道(dào)病(bìng)毒(dú)EV/柯薩奇病毒CA核酸檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015649 |
儲存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免反復凍融。
運(yùn)輸(shū):低溫,避(bì)光。
有效期(qī):一年
貨期:現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為1年(nián),這(zhè)是指在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。

u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實驗中同時滿(mǎn)足,否則(zé)該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可疑(yí)樣本;對於可(kě)疑樣本建議(yì)復核(hé)一(yī)次,若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,則(zé)判定為陽性,否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指數擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試劑運輸,保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降,可能會導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。

②鹼(jiǎn)基配對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
腸(cháng)道病毒EV/柯薩奇(qí)病(bìng)毒(dú)CA核酸(suān)檢測試劑盒其(qí)中引物與模板的正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性,使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結合(復性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度下進(jìn)行,結合(hé)的特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增加,被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因片(piàn)段也(yě)就能保持很高的正(zhèng)確度。再通過選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區,其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞;在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi));在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一(yī)般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電泳分析(xī),不(bù)一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素,無放射性(xìng)汙(wū)染,易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分離病毒或細菌(jūn)及培養細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細胞(bāo),活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
