產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
壞(huài)死(sǐ)性(xìng)肝(gān)胰(yí)腺(xiàn)炎細菌(jūn)(NHPB)核酸(suān)檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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壞(huài)死(sǐ)性(xìng)肝(gān)胰(yí)腺炎細菌(NHPB)核酸檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015474 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一(yī)次實驗中同(tóng)時滿足，否則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存不當或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保(bǎo)守性。
壞死性肝(gān)胰腺(xiàn)炎細(xì)菌(NHPB)核酸檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復(fù)性)可以在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的特異性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是(shì)以指數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分離病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
