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核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產品名(míng)稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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小反芻獸(shòu)疫(yì)通(tōng)用(yòng)型和(hé)野毒株(zhū)(PPR-U/ PPR-W)雙重核(hé)酸檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015643 |
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有效期(qī):一年(nián)
貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián),這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存於-20℃下,產物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍(dòng)融。

u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果應為陽性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期,Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足,否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣本(běn);對於可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī),則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性,否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試劑運輸,保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。

②鹼基配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性。
小反芻(chú)獸疫(yì)通(tōng)用型和野(yě)毒(dú)株(PPR-U/ PPR-W)雙重核酸檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(復(fù)性)可以在較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng),結合(hé)的(dí)特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其(qí)特異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞;在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶,一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加好後,即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應,一般在(zài)2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析,不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離病毒或細菌及培(péi)養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽(sòu)液(yè),毛發,細胞,活PCR技(jì)術(shù)概論。
