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核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
豬傳(chuán)染性胃腸(cháng)炎/豬流(liú)行性腹瀉(xiè)病毒/豬(zhū)A組輪狀病(bìng)毒(TGEV/PEDV/PRV-A)核酸(suān)檢測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
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豬(zhū)傳染性(xìng)胃(wèi)腸(cháng)炎(yán)/豬流(liú)行性腹(fù)瀉(xiè)病(bìng)毒(dú)/豬A組(zǔ)輪(lún)狀病(bìng)毒(TGEV/PEDV/PRV-A)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015632 |
儲存(cún)條件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效期一般(bān)為1年，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
豬傳染(rǎn)性胃腸(cháng)炎/豬(zhū)流(liú)行(háng)性(xìng)腹(fù)瀉病毒(dú)/豬A組(zǔ)輪狀病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)核酸檢測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合的特(tè)異(yì)性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能保持很(hěn)高的正確度(dù)。再通過選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
