產(chǎn)品中(zhōng)心
核(hé)酸檢測試劑(jì)盒(hé)
禽流感病毒(dú)H/H/新(xīn)城(chéng)疫(yì)病毒(dú)(AIV-H/H/NDV)核酸檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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禽(qín)流感(gǎn)病(bìng)毒H/H/新城(chéng)疫病毒(dú)(AIV-H/H/NDV)核酸檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015623 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數(shù)擴增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次實驗(yàn)視為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣本(běn)建議復核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可(kě)能會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保守性(xìng)。
禽(qín)流(liú)感(gǎn)病(bìng)毒H/H/新城疫(yì)病毒(AIV-H/H/NDV)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因片段(duàn)也就(jiù)能保持很高的(dí)正確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標本(běn)如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
