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核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
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禽(qín)流感病毒(dú)H/H亞型(AIV-H/H)核(hé)酸檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015621 |
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸(shū):低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有效(xiào)期:一年
貨期(qī):現貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期(qī)一般為1年,這是指在適當的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定:將閾(yù)值綫設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等於35;
3. 以上要求需在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則該次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn);對於(yú)可疑樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一(yī)次,若復核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī),則判(pàn)定為陽(yáng)性,否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰性:無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能(néng)下降,可(kě)能會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。

②鹼(jiǎn)基配對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性;
④靶基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守性。
禽(qín)流(liú)感(gǎn)病(bìng)毒H/H亞(yà)型(AIV-H/H)核酸(suān)檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配對原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng),使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行,結合的特(tè)異性大大(dà)增加,被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性和保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細胞;在病(bìng)毒的檢測(cè)中,PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位);在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加好(hǎo)後,即在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性-退火-延伸反應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗嗽(sòu)液,毛(máo)發,細(xì)胞(bāo),活PCR技術(shù)概論。
