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核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑盒
轉(zhuǎn)基因植(zhí)物(wù)CryA(c)基(jī)因核酸檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
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轉基因植(zhí)物(wù)CryA(c)基因核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015602 |
儲存(cún)條件:-20℃避(bì)光保存,避免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有效期(qī):一年(nián)
貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期一般為1年,這是指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下,產物檢測部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為陽性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī),Ct值(zhí)應小於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足,否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次,若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期,則(zé)判(pàn)定為陽性,否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑汙染,樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假陽性結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū),保存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能下降(jiàng),可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰性結(jié)果(guǒ)。

②鹼基(jī)配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性;
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
轉基(jī)因(yīn)植(zhí)物(wù)CryA(c)基(jī)因(yīn)核(hé)酸檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行(háng),結合(hé)的(dí)特(tè)異性大大增加,被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也(yě)就能保持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的,能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞;在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析,不一定要(yào)用同(tóng)位素,無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌及培養細胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標(biāo)本如血液,體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞,活PCR技術概論(lùn)。
