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核酸(suān)檢測(cè)試劑(jì)盒
轉(zhuǎn)基因(yīn)植物(wù)NOS終止(zhǐ)子核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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轉(zhuǎn)基(jī)因植物(wù)NOS終止子(zǐ)核酸檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015594 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以上要求需在(zài)一次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本建議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
轉(zhuǎn)基(jī)因植物(wù)NOS終止(zhǐ)子核酸(suān)檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特異性大大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產物(wù)一般用電泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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