產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
核酸檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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綿羊CYTB基因核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015578 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗視為無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與保守性。
綿(mián)羊CYTB基(jī)因核酸檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合(hé)的特異性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段也就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待(dài)測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶細胞；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
