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核(hé)酸檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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山羊(yáng)CYTB基因(yīn)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015577 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議(yì)復核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引起的試劑檢測(cè)效能下(xià)降，可能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
山羊(yáng)CYTB基(jī)因核酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反應中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng)，結合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性高的靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢出一個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要(yào)用同位素，無放(fàng)射(shè)性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要求低
不(bù)需(xū)要分離病毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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