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核(hé)酸(suān)檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
|
EB病毒(EBV)核酸(suān)檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015569 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的忠實性；
④靶基(jī)因的特異性與保守性(xìng)。
EB病毒(dú)(EBV)核(hé)酸檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模板(bǎn)的正確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度下(xià)進行，結合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保守性高的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一般用電泳分析，不一定要(yào)用(yòng)同位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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