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核酸(suān)檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 規格 | 貨號 |
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布(bù)尼(ní)亞病(bìng)毒（BV）核(hé)酸(suān)檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015566 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期(qī)，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢測效能下降，可能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
布尼亞病(bìng)毒（BV）核酸檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的正確結合是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模板的(dí)結合及引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特異(yì)性和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū)，其(qí)特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個靶細胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反(fǎn)應液加好後，即在DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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