產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號(hào) |
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鉤端(duān)螺旋體(Lep)核(hé)酸檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015543 |
儲存條件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有效期一般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好超過正常(cháng)陰性質控品擴增曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性，有明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑(yí)樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
鉤(gōu)端螺旋體(tǐ)(Lep)核酸檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的特異性大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因片段也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因區，其特異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數方式增加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板。可直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
