產品中(zhōng)心(xīn)
核(hé)酸檢測試劑(jì)盒(hé)
腸(cháng)集(jí)聚性大腸(cháng)杆(gān)菌(EAEC)核酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨號(hào) |
|
腸集聚性(xìng)大腸杆菌(EAEC)核酸檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015528 |
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保(bǎo)存,避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸:低溫,避光。
有效期(qī):一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī):現貨PCR試劑盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián),這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的儲存溫度下。核酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試劑一般要貯存於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。

u 閾值(Threshold)設定:將閾(yù)值綫設定在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng),有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次實驗(yàn)中同時滿足,否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本;對於可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次(cì),若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,則判(pàn)定(dìng)為陽性,否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染,試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸(shū),保存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引起的試劑(jì)檢測效能下降(jiàng),可能會導致出現假陰性(xìng)結果。

②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性。
腸(cháng)集聚(jù)性(xìng)大(dà)腸杆菌(jūn)(EAEC)核(hé)酸檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模板的結合及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性,使反(fǎn)應(yīng)中模板與引(yǐn)物的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進行,結合的特異(yì)性大大增加,被擴(kuò)增的靶基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區,其(qí)特異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指數方式增加的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo);在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應,一般在(zài)2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析,不一定要用同位素,無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
