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核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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沙(shā)門(mén)氏菌(jūn)SPP-sdfi核酸檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015499 |
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與保守性(xìng)。
沙門氏(shì)菌(jūn)SPP-sdfi核酸檢測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性)可以在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保持很高的正確度。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地將反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析，不一定要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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