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核(hé)酸檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
出(chū)血性(xìng)大腸杆菌O:H(EHEC O)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
|
出血性大(dà)腸(cháng)杆(gān)菌O:H(EHEC O)核酸檢測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015496 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次(cì)實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足，否則該次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配製不(bù)準確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
出(chū)血(xiě)性大(dà)腸杆(gān)菌(jūn)O:H(EHEC O)核酸(suān)檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指數方(fāng)式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要求低
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
