產品(pǐn)中心(xīn)
核酸檢測試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 規格 | 貨號 |
|
C型產氣莢(jiá)膜杆菌(CP-C)核(hé)酸檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015493 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產物(wù)檢測部分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結(jié)果分析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該次實驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可(kě)能會導致出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
C型(xíng)產(chǎn)氣莢膜杆菌(CP-C)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可以在較高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結合的特異性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再通過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應。擴增產物一(yī)般用電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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