產(chǎn)品中(zhōng)心
核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
|
河(hé)弧(hú)菌(jūn)(VF)核酸檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015494 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是指在(zài)適當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存不當或試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
河弧菌(jūn)(VF)核(hé)酸(suān)檢測(cè)試劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能保持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一(yī)個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如血液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
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