大鼠海(hǎi)綿體平滑(huá)肌(jī)細胞

大鼠(shǔ)海綿(mián)體平滑肌細胞(bāo)分(fēn)離(lí)自(zì)海綿(mián)體(tǐ)組織
；海綿體，又稱(chēng)海綿(mián)體肌，是(shì)最硬(yìng)的平(píng)滑肌和(hé)結締組(zǔ)織。海(hǎi)綿(mián)體(tǐ)是一(yī)種(zhǒng)勃(bó)起(qǐ)組(zǔ)織，外(wài)麵(miàn)包有(yǒu)堅厚的白膜，內(nèi)部(bù)由(yóu)結(jié)締組(zǔ)織和平滑(huá)肌(jī)組(zǔ)成海(hǎi)綿(mián)狀支架，其腔隙與血(xiě)管相(xiāng)通(tōng)。它主(zhǔ)要(yào)包(bāo)括(kuò)海綿(mián)體內皮細胞，平(píng)滑肌細胞和成(chéng)纖維(wéi)細(xì)胞3種細(xì)胞成分(fēn)。其中平滑肌(jī)細胞(bāo)和(hé)成(chéng)纖維細胞(bāo)鑲(xiāng)嵌於海綿體細胞(bāo)外(wài)基(jī)質的膠(jiāo)原中，在(zài)消(xiāo)化(huà)海(hǎi)綿(mián)體組織(zhī)時，膠(jiāo)原(yuán)酶(méi)的作用(yòng)主要(yào)是(shì)鬆(sōng)解海綿體(tǐ)內皮(pí)細胞與(yǔ)基(jī)膜的(dí)聯係(xì)，破(pò)壞海(hǎi)綿體內皮細(xì)胞(bāo)間的緊(jǐn)密(mì)連(lián)接(jiē)。因此可用(yòng)膠原酶分(fēn)離出海(hǎi)綿(mián)體(tǐ)平滑肌細胞(bāo)。平滑肌，是非(fēi)橫紋(wén)肌(jī)的(dí)肌(jī)肉(ròu)組(zǔ)織(zhī)。分布(bù)在(zài)人體(tǐ)動脈和(hé)靜脈(mài)血管壁(bì)，膀胱，子(zǐ)宮，男性和女性(xìng)生(shēng)殖道(dào)，消(xiāo)化道(dào)，呼吸道(dào)，眼(yǎn)睛(jīng)的(dí)睫狀肌(jī)和虹膜(mó)。平滑(huá)肌細(xì)胞(bāo)原(yuán)代分離(lí)培(péi)養3天後，可(kě)見(jiàn)細(xì)胞貼(tiē)壁伸展，細胞形態大小不(bù)一，呈梭形(xíng)，不(bù)規(guī)則(zé)形，三(sān)角(jiǎo)形或扇(shàn)形，核(hé)卵(luǎn)圓(yuán)形，居中
；2周後(hòu)細(xì)胞(bāo)匯(huì)合(hé)，多數細(xì)胞(bāo)伸展(zhǎn)呈(chéng)長(cháng)梭(suō)形(xíng)，胞漿豐富(fù)，有分枝狀(zhuàng)突起，細(xì)胞平行排列成單(dān)層或部分區(qū)域(yù)多(duō)層重疊(dié)生長(cháng)，高低(dī)起(qǐ)伏
；細(xì)胞(bāo)密(mì)度低時，常(cháng)交織成(chéng)網(wǎng)狀
；密(mì)度高(gāo)時，則排列(liè)為(wéi)旋渦狀或(huò)柵欄狀(zhuàng)。傳代後細胞生(shēng)長(cháng)較快，4-6天(tiān)即(jí)可匯(huì)合(hé)，並保持上(shàng)述(shù)形(xíng)態(tài)學特征(zhēng)和生長特(tè)點。

自(zì)備試劑： 0.25%胰蛋白(bái)酶(méi)  ，PBS  ，完全培養基(jī)

培養基(jī)： 大鼠海(hǎi)綿(mián)體平滑肌(jī)細(xì)胞專用培(péi)養(yǎng)基(jī)(含FBS，生長(cháng)添加劑，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換(huàn)液頻率(shuài)： 每2-3天換液一次

生(shēng)長特性： 貼壁

細(xì)胞(bāo)形態(tài)： 成纖維細胞樣(yàng)

傳(chuán)代比例(lì)： 1:2

傳(chuán)代(dài)特性： 可傳(chuán)3-5代(dài)左右(yòu)
；3代(dài)以內狀態(tài)最佳

消化(huà)液(yè)： 0.25%胰蛋白酶

大鼠海(hǎi)綿(mián)體平(píng)滑肌(jī)細(xì)胞(bāo)體外培(péi)養周期有限
；建(jiàn)議使用配(pèi)套的(dí)專(zhuān)用生(shēng)長培(péi)養基及(jí)正(zhèng)確的操作方(fāng)法來(lái)培(péi)養(yǎng)，以此保證該(gāi)細胞的最(zuì)佳培養狀(zhuàng)態。

方法(fǎ)簡介 實(shí)驗室分(fēn)離的(dí)大鼠海(hǎi)綿體平滑肌細(xì)胞采用(yòng)膠原酶消化法結合差(chà)速(sù)貼(tiē)壁(bì)法製備(bèi)而(ér)來(lái)，細胞總量約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量檢(jiǎn)測 實驗(yàn)室(shì)分離的大(dà)鼠海綿(mián)體(tǐ)平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定(dìng)，純度可(kě)達90%以(yǐ)上，且不(bù)含有HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原體(tǐ)，細菌，酵母(mǔ)和(hé)真菌等。