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PCR檢測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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牛(niú)撚轉(zhuǎn)胃(wèi)蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
Mecistocirrus digitatusPCR |
YS-P014410 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次(cì)，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現假陽性結果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守性。
牛(niú)撚轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完成擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用同(tóng)位素，無放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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