產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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雞馬立(lì)克(kè)病(bìng)毒(dú)(MDV)核(hé)酸檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015372 |
儲存(cún)條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有效期(qī):一年(nián)
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián),這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最高點。
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性,有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視為無(wú)效。
2.可疑:有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本;對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次(cì),若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期,則判定(dìng)為陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng);
3. 陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染,試劑(jì)汙(wū)染,樣品交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ);
2. 試劑運輸(shū),保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引起的試劑檢測(cè)效能下降(jiàng),可(kě)能會導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。

②鹼基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性;
④靶基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
雞馬(mǎ)立(lì)克病毒(dú)(MDV)核酸檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引物與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的溫(wēn)度下(xià)進行,結合的特異性(xìng)大大增加(jiā),被擴增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區,其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的生成量是以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞;在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後,即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火-延伸反應(yīng),一(yī)般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染,易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求低
不需要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè),體腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞,活PCR技術概論。
