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核(hé)酸檢測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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禽流(liú)感病(bìng)毒(dú)通用(yòng)型(AIV-U)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015391 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超過正常陰性質控(kòng)品擴增曲綫的最高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能下降，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
禽(qín)流感(gǎn)病(bìng)毒(dú)通用(yòng)型(AIV-U)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中模板與引物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保持很高的(dí)正確度(dù)。再通過選擇特異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定要用同位素，無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求低
不需要分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
