產品中(zhōng)心
核(hé)酸檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨號 |
|
甲(jiǎ)型流(liú)感病毒N亞(yà)型(IAV-N)核酸檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015395 |
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
甲(jiǎ)型流感病毒N亞型(xíng)(IAV-N)核酸檢測(cè)試(shì)劑盒其中引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的特異性大大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能(néng)保持很高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用同位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需(xū)要分離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
