產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
|
禽(qín)流感病(bìng)毒(dú)N亞(yà)型(xíng)(AIV-N)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015396 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是指在適當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑一般要貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定在剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否則該次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於可(kě)疑樣本建議復核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性。
禽(qín)流(liú)感病(bìng)毒(dú)N亞型(xíng)(AIV-N)核酸(suān)檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循鹼基配(pèi)對原則(zé)的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫度(dù)下(xià)進行，結合的特異性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不需(xū)要(yào)分離(lí)病毒或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
