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核酸檢測試劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名(míng)稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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豬(zhū)圓環病毒通用(yòng)型(xíng)(PCV-U)核酸(suān)檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015398 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這是指在適當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時滿足，否則該次實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因的特(tè)異性與保(bǎo)守性(xìng)。
豬圓(yuán)環(huán)病毒通(tōng)用型(xíng)(PCV-U)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引物與模板的正確結合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結合及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫度(dù)下進行，結合的特(tè)異性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再(zài)通過選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量是以指數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用電泳分(fēn)析，不一定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求低
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術概(gài)論。
