產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
核(hé)酸檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
偽狂(kuáng)犬(quǎn)病(bìng)毒通(tōng)用(yòng)型(PRV-gB)核(hé)酸檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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偽(wěi)狂犬(quǎn)病毒(dú)通用型(xíng)(PRV-gB)核(hé)酸檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015397 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年，這是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一般要貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應(yīng)為陽性，有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣本建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的忠實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
偽狂(kuáng)犬病(bìng)毒通(tōng)用型(xíng)(PRV-gB)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模板與引物的(dí)結合(復性)可以在較高的(dí)溫度下進行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保持很高的正確(què)度(dù)。再通過選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加好後，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用電泳分析(xī)，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為擴增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
