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核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號 |
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轉基(jī)因水稻TT-(BT)基(jī)因(yīn)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015597 |
儲存條件:-20℃避光保存,避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有效(xiào)期:一年(nián)
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián),這(zhè)是指在適當(dāng)的儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定:將閾(yù)值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足,否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效。
2.可(kě)疑:有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本;對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì),若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期(qī),則判定為陽性(xìng),否(fǒu)則判(pàn)定為陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣(yàng)品交叉汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;
2. 試劑運輸(shū),保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降,可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結果。

②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性;
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
轉基因水稻TT-(BT)基因核酸(suān)檢測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼基配對原則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性,使反應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng),結合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴增的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區,其特(tè)異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的,能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi));在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性(xìng)-退火-延伸反應,一般(bān)在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴增產物一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析,不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素,無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染,易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標本如血(xiě)液(yè),體腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發,細(xì)胞,活(huó)PCR技術概論。
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