產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
核酸檢測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 規(guī)格(gé) | 貨號 |
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轉基(jī)因(yīn)大豆(dòu)EPSPS基因(yīn)核(hé)酸檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015596 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴增部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
轉(zhuǎn)基(jī)因(yīn)大(dà)豆EPSPS基因(yīn)核酸檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物(wù)與模板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行，結(jié)合的特異(yì)性大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保(bǎo)持很高的(dí)正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一個靶細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增反應。擴增產物一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要用同位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
