細(xì)胞增(zēng)殖(zhí)檢測試劑盒的(dí)核(hé)心原理(lǐ)在(zài)於通過定(dìng)量(liáng)分(fēn)析細(xì)胞代謝活性(xìng)或(huò)DNA合成情(qíng)況，間接(jiē)反映(yìng)細(xì)胞增殖(zhí)狀態。目前主(zhǔ)流(liú)技(jì)術(shù)路綫(xiàn)可分為代(dài)謝活性(xìng)檢(jiǎn)測法和DNA標記法兩大類。

代謝活性(xìng)檢(jiǎn)測法主要(yào)基於(yú)活(huó)細(xì)胞(bāo)綫粒體脫(tuō)氫(qīng)酶的(dí)作用機(jī)製(zhì)。以CCK-8試(shì)劑(jì)盒為例(lì)，其水(shuǐ)溶性四唑鹽(yán)WST-8在電(diàn)子載(zǎi)體1-Methoxy PMS存在(zài)下，被細胞內脫氫酶(méi)還原(yuán)生成橙(chéng)黃色(sè)甲臢產(chǎn)物。該反(fǎn)應(yīng)具(jù)有(yǒu)兩(liǎng)個關鍵特(tè)性：首(shǒu)先，甲(jiǎ)臢(zā)生(shēng)成量與(yǔ)活細胞數量呈正相(xiāng)關
；其次(cì)，產物在(zài)450nm處(chǔ)具有特(tè)征吸收峰，可(kě)通(tōng)過酶(méi)標(biāo)儀進行精(jīng)確(què)定(dìng)量。值(zhí)得注(zhù)意(yì)的是，該(gāi)方法檢(jiǎn)測(cè)的(dí)是細(xì)胞群體的(dí)整體代謝活(huó)性，因此需注(zhù)意(yì)避免高濃度血(xiě)清(qīng)或還(huán)原性(xìng)物(wù)質(zhì)的(dí)幹擾(rǎo)。

新(xīn)興(xīng)的實時(shí)檢(jiǎn)測(cè)技術則采(cǎi)用特殊(shū)熒(yíng)光(guāng)底物，如resazurin係列(liè)染料。這類(lèi)氧(yǎng)化還原(yuán)指示(shì)劑在還原態時(shí)會(huì)發(fā)出強(qiáng)烈(liè)熒光，且具有可逆反應特(tè)性(xìng)，允許(xǔ)對同(tóng)一(yī)批細胞進(jìn)行(háng)持續多(duō)時間點(diǎn)監(jiān)測(cè)，特(tè)別適(shì)用(yòng)於(yú)動(dòng)態(tài)研究藥物對細胞增殖的時效關(guān)係。實(shí)驗數(shù)據(jù)顯示(shì)，這(zhè)種方(fāng)法(fǎ)的檢測靈(líng)敏度較傳統MTT法提高(gāo)約(yuē)40%，且毒性更(gēng)低。

在DNA標(biāo)記法(fǎ)領域，EdU檢(jiǎn)測技(jì)術因其操作簡(jiǎn)便性(xìng)正逐步取代(dài)傳(chuán)統(tǒng)的BrdU法(fǎ)。EdU的炔(quē)烴基(jī)團能與熒(yíng)光標(biāo)記(jì)的疊氮化物通(tōng)過(guò)點擊化學(xué)反應高(gāo)效結(jié)合(hé)，省去了BrdU檢測(cè)所(suǒ)需(xū)的DNA變性(xìng)步驟。最新改良(liáng)方案(àn)采用流式細胞(bāo)術(shù)結合EdU/Hoechst雙(shuāng)染色(sè)，可(kě)同步分(fēn)析細胞(bāo)周期分布與(yǔ)增殖比例，為腫瘤藥敏試(shì)驗(yàn)提(tí)供更(gēng)全麵(miàn)的數(shù)據支持。
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